Spädning
Problem: C3 finns i hög koncentration i serum och behöver därför spädas 1:10 000 gånger till ELISAn.
Du behöver 1 ml (slutvolym) av serum spätt 1:10 000 med PBS-tween. Spädningen måste göras i två steg 1:100 och sedan 1:100 igen. Minsta provvolym som får pipetteras är 10 mikroliter.
Jag förstår att jag behöver ta 10 mikroliter från den första spädningen för att få 1 mL som är spätt 1:10 000 (V1 = V2 x C2 / C1 = 1 ml x 1 ml / 100 ml= 0,01 ml = 10 mikroliter) men jag vet inte hur jag ska göra det första spädningssteget?
Du får ta 10 mikroliter av ursprungslösningen och späda den till 1 ml (fastän du egentligen it´nte behöver så mycket)..
Så V1 är 10 mikroliter för båda stegen?
Ja, det står ju i uppgiften att
Minsta provvolym som får pipetteras är 10 mikroliter.
oki tack!