PBS VS destillerat vatten

Lär mig skrev:

Gör det något skillnad om man späder en viss koncentration med dest. vatten vs PBS påverkar det spektrofotometer mätningar, och hur kan de  påverkar standard ? 

Om lösningarna är exakt lika i sin sammansättning, kan du (med gott fog) anta att spädningen inte kommer påverka absorbansen, enligt Beer-Lamberts lag.

Men är dina två lösningar exakt lika?

Jag menar om man späder PBS ist för dest. vatten och tvärtom kan det påverkar mätningar eller kommer t.ex PBS att reagera med standard (Magnesium t.ex) och ger falska värde vid mätning och samma med vatten?

Vad betyder PBS? Är det fosfatbuffrad saltlösning? (enligt eng Wiki, det fanns inget på sve wiki).

Ja, stämmer

Om du ändrar på två parametrar (t.ex. vätskans sammansättning och koncentration) samtidigt, kan du då med säkerhet veta att en förändring i absorbansen beror på antingen koncentrationen, eller ändringen i vätskans sammansättning? Eller är förändringen i absorptionen en kombination av att du ändrat på båda?

Jag ska späda magnesium och glukos och undrar om man vilket är bäst och späda med des.vatten eller PBS. 

Det beror både på vilken vätska ämnet är löst i, d.v.s. stocklösningens sammansättning, samt de andra vätskorna och hur de blandas.

T.ex.du vill ha en reaktionsblandning att tillsätta till ett protein, där blandningen skall bestå av 1xPBS (eller en definierad koncentration), med 50mM glukos, och 1 mM magnesiumklorid, så måste du blanda den beroende på de andra lösningarna.

Stocklösning glukos 2M i vatten

100mM MgCl2 i vatten

1 M glukos i vatten

2x PBS (d.v.s. 2 gånger slutkoncentrationen).

I detta fall kan du späda glukos och magnesiumklorid i vatten, så länge du kan tillsätta halva slutvolymen av 2x PBS (och då få 1xPBS). Resten av volymen får du tillsätta med glukos- och magnesiumkloridlösning, samt destillerat vatten upp till slutvolymen.

Är däremot glukoslösningen i 1xPBS måste du minska mängden 2xPBS, annars blir slutkoncentrationen för hög (motsvarande: 50% av slutvolymen av 2x PBS + 5% av slutvolymen glukoslösning i 1xPBS).

Oftast späds ämnen i vatten, för att slippa kompensera för att när olika volymer av ämnet tillsätts, tillsätts även olika stora mängder 1xPBS.

Eller så tillsätts samma volym av de olika spädningarna av t.ex .glukos i vatten, och vatten till nollprovet, så slutkoncentrationen av PBS blir lika stor (men inte nödvändigtvis 1x).

Tack så mycket för hjälpen!