Mikrobiologiskt arbete
Hej, jag ska utföra en laboration där jag ska odla mjölksyrabakterier. Men dessa bakterier kommer antingen i tablettform eller i kapslar, det vill säga att jag kommer behöva krossa dem med hjälp av en mortel och pistill eller strö ut pulvret. Men vad är nästa steg? Jag ska sprida ut dessa bakterier på en petriskål med en rackla, men hur får jag mina bakterier till en vätska?
Jag undrar också varför man använder avjonat vatten när man ska förbereda en NA lösning? Vad händer om man använder vanligt kranvatten?
Ett alternativ är ju att blanda kapslarna med en näringsbuljong och inkubera så att bakterierna kan föröka sig och ”aktiveras”, men det kanske är överkurs. Så brukar man i alla fall göra om man har en befintlig lösning med bakterier där man vill öka mängden lösning. Sedan kan man ta en steriliserad ympnål och ympa bakterierna på agarplattan. Sedan tar man racklan och sprider ut provet över hela plattan. Sätt på locket och inkubera (helst med locket nedåt - annars får du kondens på locket och ser inte plattan utan att behöva lyfta på locket. Det kan vara riskabelt i de fall man odlar sjukdomsalstrande bakterier).
Anledningen till att man undviker kranvatten är för att det vattnet är klorerat vilket kan skada bakterierna. Man vill ju normalt inte ha bakterietillväxt i kranvatten.
Okej tack för ditt svar. Det var till god hjälp!
Det var det där med näringsbuljong som jag också hittade på nätet, så det är inte överkurs för min del utan precis det jag sökte efter :). Jag har kapslar med pulver inuti.
Såhär står det på innehållsförteckningen:
"Innehåll per kapsel:
Mjölksyrabakterier 5 md –
varav:
Lactobacillus acidophilus 0,85 md –
Lactobacillus plantarum 0,85 md –
Bifidobacterium bifidum 0,85 md –
Lactobacillus casei 0,60 md –
Lactobacillus rhamnosus 0,60 md –
Bifidobacterium longum 0,60 md –
Bifidobacterium lactis 0,60 md –
(md = miljarder)"
Hur tycker du koncentrationen av näringsbuljongen och bakterierna borde vara. Har du t.ex. förslag på några mått för jag har ingen aning, har inte heller hittat någon metod på nätet.
Vad ska du göra för laboration och vad har du tillgång till för utrustning? Jag hade berett näringsbuljong i en 250 ml flaska (brukar finnas flaskor av värmetålig borosilikat, de med blåa skruvkorkar), autoklaverat den och sedan löst upp innehållet i en tablett i buljongen när den har svalnat. Sedan inkuberat den över natten vid 37 grader. Då har du förhoppningsvis fått en lösning med många aktiva bakterier. Ett tips är att kolla pH-värdet i detta skede, för eftersom dessa bakterier bildar mjölksyra borde pH ha sjunkit om det finns aktivitet i lösningen.
Du får nog testa dig fram och se om det fungerar, annars får du tänka ut någon ny metod. Det viktiga är att arbeta sterilt så att du inte odlar fram något av misstag, t.ex. någon tarmbakterie du kanske har på händerna.
Okej, det låter som en bra metod. Jag ska kolla med min lärare om de har näringsbuljong. Om det skulle vara så att skolan inte har det, finns det något annat sätt man kan göra? Och hur kollar man pH?
Tack för ditt svar!
pH kollar du enklast med en pH-elektrod, annars med pH-papper.
Ok tack!
