Måste jag byta buffert för att rena mitt protein?
Jag har ett protein som ska vidare renas med jonbyteskromatografi och ska då använda en särskild startbuffert med pH 8 som är kompatibel med den kolonn jag ska använda och även såklart optimal för att mitt protein ska binda in till kolonnen.
I tidigare reningssteg har jag använt mig av en fosfatbuffert pH 7.
Det här är säkert en dum fråga men är det OK att jag injicerar mitt prov som ju fortfarande har en fosfatbuffert till kolonnen efter startbufferten? Är det OK att det är en annan slags buffert så länge den har samma pH som startbufferten för kromatografi?
Tack på förhand!
Vad står det om detta i din labandledning? Vad säger din handledare?
Det är en teoretisk uppgift där jag ska göra ett protokoll... Så teoretiskt sett, brukar man byta buffert i en lång reningsprocess? Exempelvis om jag har fått en pellet av mitt protein efter centrifugering, kan jag då välja att lösa det i en ny buffert?