kromatografi - HPLC tolka kromatogram
Hej!
Jag försöker lösa följande uppgift...
Jag har lyckats dra ner alternativet till A, B, och C för analys I. Jag tänker att separationen sker långsammare om den mobilafasen innehåller 50% metanol jämfört med 70%. Sedan tänker jag att ämne 2 sommer binda starkare till kolonnen då den har en längre kol"kedja", vet inte om bensenringar räknas som kolkedja eller om det är något annat (kanske OH-grupperna) som jag har missat.
Jag vet att svaret ska bli C, men det jag inte förstår är vad absorbansen innebär eller hur jag ska koppla den till hur molekylerna ser ut. Är absorbansen koncentrationen? För då tänker jag att jag ser jag ju att 1 är lägre än 2.
I övrigt tror jag att jag är osäker på vad som gör en molekyl polärt eller opolärt. Jag förstår konceptet, men inte hur jag ska kunna SE det på bilden. Jag vet att en längre kolkedja gör ett ämne mer opolärt men finns det flera sätt att avgöra det?
Jag antar att du än så länge har svarat endast för analys (I), och svarar därefter.
Fleetstreet skrev:Jag har lyckats dra ner alternativet till A, B, och C för analys I. Jag tänker att separationen sker långsammare om den mobilafasen innehåller 50% metanol jämfört med 70%.
Det är korrekt, både ämne 1 och 2 löser sig sämre i 50% metanol, jämfört med 70%, och retentionen i kolonnen blir då längre, då ämnena binder lite bättre till den stationära fasen vid 50%.
Sedan tänker jag att ämne 2 sommer binda starkare till kolonnen då den har en längre kol"kedja", vet inte om bensenringar räknas som kolkedja eller om det är något annat (kanske OH-grupperna) som jag har missat.
Rätt tänkt, 2 är betydligt mindre polär (sett till hela molekylen), med sin extra bensenring. Karboxylsyragruppen är dessutom ersatt med en bensolyester, vilket gör 2 betydligt mer opolär. Så lösligheten av 2 i 50% metanol/vatten blir lägre, och den binder då lite bättre/längre till den stationära fasen.
Jag vet att svaret ska bli C, men det jag inte förstår är vad absorbansen innebär eller hur jag ska koppla den till hur molekylerna ser ut. Är absorbansen koncentrationen? För då tänker jag att jag ser jag ju att 1 är lägre än 2.
De två sista meningarna i uppgiften innehåller all information för att förklara/motivera varför absorbanstoppen för 2 är högre än 1 (ta en titt på Beer-Lamberts lag, för lite mer bakgrund), och fråga igen om du inte riktigt hittar svaret, eller får nya frågor.
I övrigt tror jag att jag är osäker på vad som gör en molekyl polärt eller opolärt. Jag förstår konceptet, men inte hur jag ska kunna SE det på bilden. Jag vet att en längre kolkedja gör ett ämne mer opolärt men finns det flera sätt att avgöra det?
Polaritet brukar dyka upp under gymnasiekemin (och finns beskriven på många ställen om du söker lite). Kort om dina ämnen så finns en det stor skillnad i elektronegativitet mellan två atomer som binder till varandra, kan en dipol fås, liknande mellan C-OH. T.ex. ämne 1 har en blandning av polära och icke-polära delar, i princip är endast hydroxi- och karboxylgruppen polära i förening 1, resten av molekylen är att betrakta som icke-polär.
Tusen tack för all hjälp!! Jag antar att man egentligen (för denna uppgift) inte riktigt behöver sätta in värdena i lambert-beers lag eftersom det är uppenbart redan eftersom de har samma koncentration och jag antar att det tas förgivet att längden är 1 cm?
Fleetstreet skrev:Tusen tack för all hjälp!! Jag antar att man egentligen (för denna uppgift) inte riktigt behöver sätta in värdena i lambert-beers lag eftersom det är uppenbart redan eftersom de har samma koncentration och jag antar att det tas förgivet att längden är 1 cm?
Nej Labert-Beers lag spelar roll, som du ser i kromatogramet (c) är arean under kurvan inte lika stor för ämne 1 och 2, detta trots att koncentrationen är identisk - så det finns en ytterligare faktor som gör att absorbansen inte är densamma trots att koncentrationen är densamma.