Centrifugering
Uppgift: Du skall arbeta med två olika preparationer (A och B) av nanopartiklar men du har av misstag råkat hälla samman de båda rören med nanopartiklar. Båda preparationerna består av partiklar med diametern 150 nm men partiklarna i preparation A har densiteten 1.15 g/ml och partiklarna i preparation B 1,25 g/ml. Hur gör du för att få ett rör som bara innehåller A partiklar och ett annat rör som bara innehåller B partiklar. Förklara hur du gör.
Lösning: I det här fallet kan man använda sig av antingen densitetkudde eller En diskontinuerlig gradient för sedan skiljes de åt och kan pipetera en för sig. Tänker jag rätt? eller kan man använda sig av något annat?
Preparativ (ultra)centrifugering i ett medium med diskontinuerlig densitet, låter som ett bra alternativ. Skillnaden i densitet är den enda som framgår i uppgiften.
Skulle endast en av nanopartikeltyp ha ytterligare en egen egenskap, t.ex. (para)magnetism skulle en sådan skillnad istället kunna utnyttjas.
mag1 skrev:Preparativ (ultra)centrifugering i ett medium med diskontinuerlig densitet, låter som ett bra alternativ. Skillnaden i densitet är den enda som framgår i uppgiften.
Skulle endast en av nanopartikeltyp ha ytterligare en egen egenskap, t.ex. (para)magnetism skulle en sådan skillnad istället kunna utnyttjas.
ja det är enda skillanden. Så om jag förstår rätt du föredrar mer diskontinuerlig gradient/ densitet och sedan bara att pippettera varje lösning för sig. Hur skulle det kunna utnyttjas om det skulle av nanopartikeltyp ha ytterligare en egen egenskap?
Jo det blir nog praktiskt sätt enklare att centrifugera med ett medium med ökande densitet.
Skulle du göra detta upprepade gånger kunde det vara värt att hitta en kudde. Motsvarande en sammansättning av mediumet, som är aningen tätare än de lättare partiklarna till botten av röret, och sedan medium med aningen lägre täthet. Så att de lättare partiklarna lägger sig på kudden, och de tätare partiklarna sjunger igenom kudden till botten. På detta viset kan kudden t.o.m. göras tjock så att det blir enklare att undvika oavsiktlig blandning av partiklarna, det är m.a.o. lättare att endast pipettera upp de lättare partiklarna om de tyngre är väl separerade.
Finns det ytterligare egenskaper kan dessa också användas, eller användas istället för centrifugering, men centrifugering fungerar oavsett. Välj det enklaste/smidigaste/billigaste etcetera.
ett sista fråga är att vad innebär att centrifugera med ett "medium"? tror inte riktigt jag förstår och hänger med vad som menas med det.
Medium, som i "ett material", d.v.s. det materialet som gradienten skapas av, t.ex. CsCl.
Motsvarande användning finns även i kromatografin, där kolonner packas med medium, matrix används även där. Media används även.
