Analytisk kemi HPLC
Jag behöver hjälp med följande uppgift. En provlösningen innehållande en blandning av 3 olika ämnen i ett lösningsmedel späddes genom att 20 cm3 av ämnet pipetterades till en mätkolv med som fylldes med vatten så att slutvolymen blev 250 cm3. Från mätkolven injicerades sedan en del av lösningen i en HPLC-kolonn.
Vilka är de tre olika ämnena (Ämne 1 - 10) och vilken koncentration av de olika ämnena innehöll ursprungsprovet?
Så här såg kromatogramet ut, x-axeln visar retentionstid och y-axeln visar kurvans höjd i mm:
Innan provet injicerades hade standarlösningar innehållande 10 olika kända ämnen med kända koncentrationer gjorts. Retentionstider för de 10 olika ämnena samt topparnas höjder vid olika koncentrationer av standardlösningar presenteras i tabellen nedan.
Det jag vet är att retentionstiden är specifik för varje ämne och visar därför vilket ämne det handlar om. Toppens area avslöjar däremot hur stor koncentration vi har av ämnet.
Jag tycker att diagrammet är otydligt och visar inte den exakta retentionstiden och arean. Jag tänkte först att jag skulle göra ett nytt diagram, men visste inte hur jag ska göra. Kan någon hjälpa?
Det du ska göra är att läsa av retentionstiderna och höjderna i diagrammet. Ett tips är att använda en linjal för att få mer noggranna värden.
Sedan ska du använda retentionstiderna för att identifiera ämnena i topparna. Du kanske inte får exakt samma tid som i tabellen, men då får du ta det ämne som ligger närmast.
Till sist använder du toppens höjd för att avgöra koncentrationen. Då får du göra tre små diagram med topphöjd och koncentration för de tre ämnen du identifierat och sedan lägga in ett uppmätt värde i varje diagram.
Ok, jag avläser att första toppen motsvarar ämne 3, andra ämnet motsvarar ämne 6 och tredje ämnet motsvara ämne 8. Men för ämne 1 och 2 så stämmer toppens höjd i mm vid 40mg/dm3, men för ämne 3 så stämmer det inte alls.
Jag håller med dig om identiteten på topparna. Men när det gäller koncentrationen så är det inte meningen att höjden ska matcha något i tabellen. I stället ska du göra ett diagram med koncentration på ena axeln och topphöjd på andra. Du får göra ett diagram för varje topp.
För topp 3 använder du värdena 1, 40 och 80 mg/dm3 respektive 11, 46 0ch 95 mm. Då får du tre punkter. Sedan drar du en linje genom punkterna. Den linjen använder du för att få veta vilken koncentration höjden på topp 3 motsvarar.
Sedan får du göra på motsvarande sätt för de två andra topparna.